福林酚的相关介绍

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福林酚(Folin-酚)试剂可用于测定蛋白质含量,已有许多采用这一试剂的改良分析操作进行血清、抗原-抗体沉淀物和胰岛素中蛋白质含量测定的报道。虽然这一试剂以其灵敏度高和操作简便得到推荐,但并Chemicalbook不适合普遍的生物化学应用。尽管这一试剂对某些应用有相当的优势,但在全面开发之前需掌握它的特性和局限性,已研究了pH、反应时间及反应物浓度、处理蛋白质常用试剂的允许水平和干扰物质等变化的影响。

在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。此络合物将试剂磷钼酸—磷钨酸(FolIn试剂)还原,混合物深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此方法操作简便,灵敏度比双缩脲法高倍,定量范围为5~μg蛋白质。

福林酚(Lowry)法系依据蛋白质分子中含有的肽键在碱性溶液中与Cu2+螯合形成蛋白质-铜复合物,此复合物使酚试剂的磷钼酸还原,产生蓝色化合物,同时在碱性条件下酚试剂易被蛋白质中的酪氨酸、酪氨Chemicalbook酸、色氨酸、半胱氨酸还原呈蓝色反应。在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比,以蛋白质对照品溶液作标准曲线,采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。该法灵敏度高,测定范围通常可达20~μg。



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