胃蛋白酶Pepsin分光光度法试剂盒
测定原理:
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,水解产物与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正bi。
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定步骤:
1.分光光度计预热30min,调节波长到nm,蒸馏水调零。
2.试剂三和试剂四置于37℃水浴预热30min。
3.标准管:取玻璃比色皿,加入μL标准品,μL试剂二,μL试剂五,μL试剂六,混匀后室温静置20min,于nm测光吸收,记为A标准管。
4.空白管:取玻璃比色皿,加入μL蒸馏水,μL试剂二,μL试剂五,μL试剂六,混匀后室温静置20min,于nm测光吸收,记为A空白管。
5.对照管:取EP管,加入μL蒸馏水,置于37℃水浴保温10min;加入μL试剂四,盖紧后摇匀1min;加入μL粗酶液,混匀后g4℃离心10分钟取上清;在玻璃比色皿中加入上清液μL,再加入μL试剂二,μL试剂五,μL试剂六,混匀后室温静置20min,于nm测光吸收,记为A对照管。
6.测定管:取EP管,加入μL粗酶液,μL试剂三,置于37℃水浴保温10min;加入μL试剂四,盖紧后摇匀1min;g4℃离心10分钟取上清;在玻璃比色皿中加入上清液μL,再加入μL试剂二,μL试剂五,μL试剂六,混匀后室温静置20min,于nm测光吸收,记为A测定管。
注意:空白管和标准管只需要测定一次。
测定意义:
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别,慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
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