蛋白浓度的正确检测方法,你真的get吗

来历：索莱宝

对良多人来讲，探测卵白质的浓度着实不是多艰巨的试验。但有意咱们也不能过度自傲，由于尽管最简朴的办法都有其繁杂的机理。为了扶助众人筛选确实而且简朴的办法测定卵白质的浓度，小编在这边简朴先容下几种罕用的卵白质含量测定办法的旨趣及注重事情。

一

卵白浓度探测办法

1、双缩脲法

探测旨趣：双缩脲是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中与硫酸铜反响生成紫血色络合物，此反响即为双缩脲反响。含有两个或两个以上肽键的化合物都具备双缩脲反响。卵白质含有多个肽键，在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫血色化合物（nm）。其颜色深浅与卵白质的浓度成正比。

2、Lowry法

探测旨趣：Lowry法是双缩脲法与福林酚法的连接与进展。Lowry法的包含两步反响，第一步是在碱性前提下，双缩脲试剂（碱性铜试剂），可与卵白质中的肽键其显色反响，生成卵白质-铜络合物；第二步是此络合物将Folin试剂（磷钨酸和磷钼酸搀杂液）复原成钼蓝和钨蓝搀杂物而呈蓝色反响，颜色深浅与卵白质含量成正比。

3、BCA法

探测旨趣：BCA与二价铜离子的硫酸铜等其余试剂构成的试剂搀杂一同即成为苹果绿，即BCA劳动试剂。在碱性前提下，BCA与卵白质连接时，卵白质将Cu2+复原为Cu+，劳动试剂由原本的苹果绿色变成紫蓝色络合物。nm下其光摄取强度与卵白质浓度成正比。

4、Bradford法

探测旨趣：考马斯亮蓝法测定卵白质浓度，是操纵卵白质―染料连接的旨趣，定量测定微量卵白浓度加紧、精巧的办法。考马斯亮蓝G-染料具备血色和青涩两种色彩、在酸性溶液中游离形态下为棕血色，当它经过疏水效用与卵白质连接后变成蓝色，使染料的最大摄取峰的地方，由nm变成nm，经过测定nm处光摄取的增进量可知与其连接卵白质的量。

5、紫外分光光度法

探测旨趣：卵白质中的酪氨酸和色氨酸残基的苯环中含有共轭双键，因而，卵白质具备摄取紫外光的性质，其最大摄取峰位于nm临近。在最大摄取波所长，吸光度与卵白质溶液的浓度服务郎伯-比尔定律。

6、磺基水杨酸法

探测旨趣：卵白质为两性物资，在酸性处境中带正电荷，而磺基水杨酸根带负电，碰巧与卵白质连接沉没，显示液体中有卵白存在。该办法因而浊度为变数测定卵白质含量的，卵白质浓度与浊度成正比。

二

办法对比

本文编纂：乐乐高

证实

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