混菌发酵奶牛精饲料的研究
频年来，微生物发酵技能被宽广运用在饲料产业中，饲料经发酵后，不但美味性加强，难于消化的养分物资、抗养分因子和毒素含量低沉，况且还也许抬高卵白质含量，为动物供给有利微生物及其代谢产品，以调动动物胃肠道的微生态均衡和抬高动物机体的免疫力（陶蕾等，；洪峰等，）。用于发酵饲料的菌种要紧有乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌和霉菌（李龙，；李永凯等，）。本实验采纳枯草芽孢杆菌与酵母菌混杂发酵，以真卵白质为评估目标，从菌种的接种比例、腐植酸钠增加量、麸皮含量、接种量、含水量等方面临奶牛精饲料发酵停止了探索，为奶牛精饲料的产业化临盆供给理论根据。
1材料与法子
1.1材料
1.1.1菌种枯草芽孢杆菌与酵母菌由内蒙古斯隆生物技能有限肩负公司保管与供给。
1.1.2材料奶牛精饲料、麸皮和腐植酸钠均从商场购置。
1.1.3教育基养分肉汤（1L）：卵白胨10g，牛肉膏粉3g，氯化钠5g。麦芽汁教育基（1L）：麦牙膏粉g，氯霉素0.1g。以上两种教育基均购自广东环凯微生物科技有限公司。配制固体教育基时，需参与2%的琼脂粉。
固态发酵教育基为奶牛精饲料、麸皮。奶牛精饲料构成以下：玉米卵白28.65%，豆粕5%，菜子粕5%，棉子粕7%，DDGS14.5%，盐0.8%，苏打1%，石粉1.7%，尿素0.6%，预混料0.2%，氧化镁0.15%，氢钙0.4%，玉米35%。
1.1.4仪器
看来光分光光度计、离心思、水浴锅、恒温教育箱等。
1.1.5要紧试剂
福林-酚试剂甲液：由A、B两种溶液构成。A液：4%碳酸钠溶液与0.2mol/L氢氧化钠溶液等体积混杂。B液：1%硫酸铜溶液与2%酒石酸钾钠溶液等体积混杂。哄骗前将A与B按50∶1的比例混杂即成，当天配制哄骗。福林-酚试剂乙液，购置于杭州迪测生物科技有限公司。
1.2法子
1.2.1菌种活化及种子液的制备枯草芽孢杆菌
将冷冻保管的菌种划线在灭菌的养分琼脂平皿中，37℃教育箱教育24h。待长出菌保守，挑取3～4个菌落于灭菌的养分肉汤教育基中，37℃摇床教育24h，即得种子液。酵母菌：将冷冻保管的菌种划线在灭菌的麦芽汁琼脂教育基平皿中，28℃教育箱教育24h。待长出菌保守，挑取3～4个菌落于灭菌的麦芽汁教育基中，28℃摇床教育24h，即得种子液。
1.2.2探测目标待测液的制备
称取0.3g经65℃烘干并毁坏的饲料样本，参与8mL蒸馏水，混匀参与2mol/L的氢氧化钠溶液，摇匀，50℃恒温水浴锅水浴1h，r/min离心5min，取上清液，即为待测液。真卵白质测定法子同赵书景（）的测定法子。
1.3数据处置
数据经Excel开头整治后，用SPSS17.0中的单因子方差剖析（One-WayANOVY），以P＜0.05做为不同显著水准决断准则，不同显著时采纳Duncan’s法子对各组间均匀数停止多重对照。
2成绩与剖析
2.1枯草芽孢杆菌与酵母菌的接种比例对饲料真卵白质含量的影响
枯草芽孢杆菌与酵母菌以不同比例混杂发酵奶牛精饲料，饲估中真卵白质含量见图1。
图1枯草芽孢杆菌与酵母菌的接种比例对饲料真卵白质含量的影响
由图1也许看出，枯草芽孢杆菌与酵母菌以任何比例接种都可增多饲估中真卵白质的含量，当枯草芽孢杆菌与酵母菌比例为3∶7时，真卵白质含量为18.66%，与原精料比拟抬高了3.35%（P＜0.05），故肯定枯草芽孢杆菌与酵母菌接种比例为3∶7。枯草芽孢杆菌与酵母菌是微生物发酵技能罕用的发酵菌种（甄玉国，；Antonio等，）。酵母菌菌体卵白含量高，约占菌体干物资的32%～75%，其细胞壁含有多种生物活性物资，能增进免疫反映，具备利生菌和益生元的特性和效用（朱平军，）。枯草芽孢杆菌形成的卵白酶可将大分子卵白分解为小分子卵白、肽类和游离氨基酸。两菌种在饲料发酵进程中表现不同的效用，不同配比将直接影响饲料的德行，而恰当的菌种比例会充足显露两种菌的上风，并增进其配合成长（揣玉多等，）。
2.2种子液中不同腐植酸钠增加量对饲料真卵白质含量的影响
种子液中不同腐植酸钠增加量对饲估中真卵白质含量的影响见图2。
图2种子液中不同腐植酸钠增加量对饲料真卵白质含量的影响
由图2也许看出，种子液中腐植酸钠增加量为0.5%～2%时，真卵白质含量跟着腐植酸钠的增多而加多；腐植酸钠增加量为2%～8%时，真卵白质含量跟着腐植酸钠的增多而低沉，当腐植酸钠增加量为2%时，真卵白质含量为18.46%，未增加腐植酸钠组真卵白质含量为17.25%，两者比拟，种子液中增加2%的腐植酸钠显著抬高1.21个百分点。
2.3发酵底物中不同腐植酸钠增加量对饲料真卵白含量的影响
发酵底物中不同腐植酸钠增加量对饲估中真卵白质的影响见图3。
图3发酵底物中不同腐植酸钠增加量对饲料真卵白质含量的影响
由图3也许看出，发酵底物中增加不同含量的腐植酸钠都可显然抬高真卵白质含量（P＜0.05），当腐殖酸钠增加量为0.5%～2%时，真卵白质含量跟着腐植酸钠的增多而增多；腐植酸钠增加量为2%～8%时，真卵白质含量跟着腐植酸钠的增多而低沉，当发酵底物中腐植酸钠增加量为2%时，真卵白质含量可达20.13%，未增加腐植酸钠组真卵白质含量为18.17%，两者比拟，真卵白质含量显著抬高1.96个百分点（P＜0.05）。
2.4发酵底物中麸皮增加量对饲料真卵白质含量的影响
不同的麸皮增加量对饲估中真卵白质含量的影响见图4。
图4发酵底物中麸皮含量对饲料真卵白质含量的影响
由图4也许看出，麸皮增加量为5%～15%时，真卵白质含量跟着麸皮的增多而增多，与未增加麸皮组比拟，不同显著；当麸皮增加量为15%～20%，跟着麸皮含量的增多，真卵白质含量慢慢低沉。由于5%、10%和15%组真卵白质含量离别为20.16%、20.21%、20.26%（P＞0.05），故麸皮最适增加量为5%。麸皮做为一种辅料参与究竟物中，不但可保持发酵基质的蓬松性，况且可保持符合的碳氮比，并为菌体供给成长所需的微量元素（汪伦记等，）。
2.5接种量对饲料真卵白质含量的影响
符合的接种量可有用增进菌体的成长并渗透代谢物，裁减发酵成本。不同接种量对饲估中真卵白质含量的影响见图5。
接种量对饲料真卵白质含量的影响
由图5也许看出，在总接菌量较小的情景下，菌种需求较永劫间才干大批成长，对固态物料行使率低。接种量为2.5%～7.5%，真卵白质含量跟着接种量的增多而增多；接种量为7.5%～10%，真卵白质含量跟着接种量的增多而低沉。或许是由于接菌量过大，饲估中的水份、养分成份满意不了菌体的平常代谢，制服了菌体成长；菌体成长强大，固态发酵饲料温渡太高，进而影响菌体成长。又由于2.5%、5%和7.5%组真卵白质含量离别为20.25%、20.35%、20.45%（P＞0.05），故肯定最好接种量为2.5%。
2.6含水量对饲料真卵白质含量的影响
含水量低，使菌体成长遭到制服；含水量太高，发酵料就会过湿过黏，对发酵料散热不利，在好氧发酵时影响发酵材料的透气性和氧气浓度。不同的含水量对饲估中真卵白质含量的影响见图6。
图6含水量对饲料真卵白质含量的影响
由图6也许看出，含水量为40%～50%时，真卵白质含量跟着水份的加多而加多，含水量为50%时，真卵白质含量可达20.26%，显著高于前三组（P＜0.05）；含水量为50%～60%时，真卵白质含量跟着水份的增多而低沉，出处或许是过量的游离水份影响了氧气在物估中的转达，使菌体缺氧，影响成长。由此也许得出，最适含水量为50%。
2.7发酵功夫对饲料真卵白质含量的影响
发酵功夫对饲料真卵白质含量的影响见图7。
由图7也许看出，跟着发酵功夫的增多，真卵白质含量也响应增多。发酵初期，菌体对新的成长处境适应较差，成长迟缓，代谢本事差，因而真卵白质含量较低，当发酵功夫为12、24、36、72h，真卵白质含量不同不显著（P＞0.05）。跟着发酵功夫的拉长，菌体数目加多，代谢加强，真卵白质含量慢慢增高，在48h时抵达最大，为20.16%。与发酵功夫为
图7发酵功夫对饲料真卵白质含量的影响
60h时不同不显著（P0.05），与其余组比拟，不同显著（P＜0.05）。然后，跟着发酵功夫的拉长，真卵白质含量虽有增多，但增幅很小。故肯定最好发酵功夫为48h。
2.8发酵温度对饲料真卵白质含量的影响
发酵温度也是影响微生物发酵的一个紧要成分，太高或太低都不利于菌体的成长。不同的发酵温度对饲估中真卵白质含量的影响见图8。
图8发酵温度对饲料真卵白质含量的影响
由图8也许看出，跟着温度抬高，真卵白质含量慢慢增多。当温度为34℃和36℃，真卵白质含量离别为20.11%和20.6%，不同不显著，故肯定最好发酵温度为34℃。当发酵温度为34℃和36℃时，两菌种可较好地共生，菌体成长强大，对饲料的行使率更高，菌体卵白大批形成，较大抬高饲估中真卵白质含量。
3论断
本实验前提下获得的奶牛精饲料最好发酵前提为：枯草芽孢杆菌与酵母菌接种比例为3∶7，种子液中腐植酸钠最适增加量为2%，发酵底物中腐植酸钠最适增加量为2%，麸皮含量5%，含水量50%，接种量2.5%，发酵功夫48h，发酵温度34℃。在此前提下，真卵白质含量可达19.94%，与未发酵组比拟显著抬高了4.63个百分点。
起原：华夏饲料
做家：刘向敏，齐景伟，等
预览时标签不行点收录于合集#个转载请注明：http://www.abuoumao.com/hykz/1072.html
